Центр Коллективного Пользования ::: Применение в биологии :: Протоколы

21.02.2011

Переименование ЦКП

центр коллективного пользования "Центр постгеномных технологий" переименован в ЦКП "Протеом человека"


03.03.2010

Новые услуги

Обновлен перечень услуг ЦКП

также изменены цены на отдельные услуги

смотрите раздел порядок работы - услуги и цены


02.06.2006

Форум

Появился форум


02.06.2006

Новая версия сайта

2 июня 2006 Начало работы новой версии сайта ЦКП Центр постгеномных технологий


Протоколы

Окрашивание Серебром.



  1. Фиксирование.
    25% метанол, 10% уксусая к-та
  2. Промывка.
    Вода 2×20 мин.
  3. Тиосульфат Na 0.3 г/л
    2 мин.
  4. Промывка.
    Вода 2×10 мин.
  5. Нитрат серебра 1 г/л+формалин 1мл/л
    30 мин.
  6. Отмывка
    3*30 сек
  7. Проявление.
    Na2Co3 8г/200мл+формальдегид(0.01%). +тиосульфат 4 мл из п3.
  8. Отмывка. Вода
  9. Фиксация 10% уксус.



      Отмывка от серебра.


        Стоковые растворы:

      1. Stock A

        30 mM K3Fe(CN)6
        0.98 gm/100 ml
      2. Stock B

        100 mM Na2S2O3
        1.58 gm/ 100 ml

      Врезаные из геля кусочки с пятнами помещаются в пробирки типа Eppendorf
      Для приготовления обесцвечивающего состава стоковые растворы смешиваются 1:1 непосредственно перед применением
      в пробирки с гелями вносится 50-100 мкл обесцвечивающего состава.
      Сразу после исчезновения окраски обесцвечивающий состав удаляется
      Образцы отмываются 4 раза по 15 мин водой при перемешивании





      Методические материалы для студентов



      Идентификация белка в геле


      2D-PAGE


      Электрофоретическое разделение белков